Illumina Stranded mRNA Prep

스트랜드 정보를 정밀하게 측정하여 단백질 코딩 전사체를 정확하고 공정하게 검출할 수 있는 빠르고 비용 효율적인 워크플로우입니다.

6.5시간

Assay 시간

< 3시간

수작업 시간

표준 품질 Total RNA 25~1,000 ng

사용량

상세한 정보는 사양표를 확인하세요.

개요

Illumina Stranded mRNA Prep은 새로운 아이소형, 유전자 융합 및 대립유전자 특이적 발현과 같은 특징의 발견을 위한 코딩 전사체 전반에 걸쳐 명확하고 포괄적인 분석을 위한 간소화된 RNA 시퀀싱(RNA-Seq) 솔루션을 제공합니다.

주요 기능

  • 스트랜드 방향의 정확한 측정—안티센스 전사 검출을 가능하게 하고 전사물 주석을 향상시키며 정렬 효율을 높입니다.

  • 탁월한 성능—탁월한 polyA 캡처 효율성과 적용 범위 균일성을 제공하여 코딩 전사체를 정확하고 편파적이지 않게 검출하기 위해 필요한 시퀀싱 깊이를 최소화합니다.

    기술에 대해 자세히 알아보기

  • 저입력 샘플의 고품질 데이터—25ng의 고품질 RNA*만으로 매우 민감한 결과를 달성합니다.

  • 빠른 라이브러리 준비 워크플로—TruSeq Stranded mRNA보다 라이브러리를 최대 40% 더 빠르게 준비하며, 배양 시간이 단축되고 샘플 청소 단계가 감소하여 총 분석 시간이 6.5시간입니다.

*FFPE 검체와 호환되지 않음


사양


필수 제품

처리 요구에 맞는 라이브러리 준비 키트 크기(16개 샘플 또는 96개 샘플)를 선택합니다.

고유한 이중 인덱스는 별도로 판매되며 멀티플렉싱에 필요합니다. 표적 시퀀싱 처리량에 가장 적합한 인덱싱 옵션을 선택하십시오. 세트 A, B, C 및 D를 함께 추가하여 단일 실행에서 최대 384개의 샘플을 시퀀스할 수 있습니다. 시퀀싱 처리량 및 멀티플렉싱 기능은 시퀀서 및 플로우 셀 시약에 따라 다를 수 있습니다.

/ 결과

애플리케이션

Illumina Stranded mRNA Prep을 사용하면 광범위한 샘플 유형에서 표준(비분해) RNA의 낮은 샘플 투입으로 하루에 시퀀싱 준비 전사체 라이브러리를 준비할 수 있습니다.

예시 워크플로우


프로젝트 권장 사항

기기 Recommended number of samples Read length
NextSeq 550 System

Mid output: 5
High output: 16
(based on 25M reads per sample)

2 × 75 bp

NextSeq 2000 System

P2: 16
P3: 40
(based on 25M reads per sample)

2 × 75 bp

NovaSeq 6000 System

SP: 32
S1: 64
S2: 164
S4: 384
(based on 25M reads per sample)

2 × 75 bp



관련 애플리케이션 및 방법

문서

제품 관련 자료

비교하기

Illumina Stranded mRNA Prep TruSeq Stranded mRNA Illumina RNA Prep with Enrichment Illumina Stranded Total RNA Prep with Ribo-Zero Plus or Ribo-Zero Plus Microbiome
Assay 시간 6.5시간 ~10.5시간 < 9시간 약 7시간
자동화 기능 Liquid handling robots Liquid handling robots Liquid handling robots Liquid handling robots
자동화 상세 정보 사용 가능한 자동화 방법 살펴보기 사용 가능한 자동화 방법 살펴보기
콘텐츠 사양 가닥 정보가 있는 코딩 전사체 캡처 가닥 정보가 있는 코딩 전사체 캡처 Illumina Exome Panel과 함께 사용 시 코딩 전사물 캡처 코딩 RNA와 여러 형태의 비코딩 RNA 캡처
설명 정밀한 가닥 정보가 있는 코딩 전사체의 분석을 위한 단순하고 비용 효율적인 솔루션입니다. 정밀한 가닥 정보로 연구자들에게 코딩 전사체에 대한 명확하고 종합적인 관점을 제공합니다. 포르말린 고정 파라핀 포매(FFPE) 조직 및 기타 저품질 샘플 등 광범위한 샘플의 종류와 사용량으로부터 표적 전사물(transcript) 검출 및 발견 연구를 가능하게 하는 재현 가능하고 경제적인 솔루션입니다. 다양한 RNA-Seq 애플리케이션을 지원하는 저 RNA 입력 및 저품질 샘플에서 전체 전사체 시퀀싱 준비 라이브러리를 준비하는 데 사용됩니다. 풍부한 전사체 분석을 용이하게 하기 위해 여러 종에서 rRNA 및 글로빈 RNA의 단일 튜브 고갈을 위한 Ribo-Zero Plus를 포함한다. 
수작업 시간 < 3시간 ~4.5시간 < 2시간 < 3시간
사용량 표준 품질 Total RNA 25~1,000 ng Total RNA 0.1~1 ug 또는 이전에 분리한 mRNA 10~100 ng(폴리A 꼬리가 있는 종) RNA 10 ng, FFPE RNA 20 ng 표준 품질 RNA 검체에 대해 1–1000 ng 총 RNA. 최적의 성능 및 FFPE 검체에 대해 최소 10 ng 총 RNA 권장 
Instruments NextSeq 550 System, NextSeq 2000 System, NextSeq 1000 System, NovaSeq X System, NextSeq 500 System, NovaSeq 6000 System, NovaSeq X Plus System MiSeq System, NextSeq 550 System, NextSeq 2000 System, NextSeq 1000 System, NovaSeq X System, NextSeq 500 System, NovaSeq 6000 System, NovaSeq X Plus System MiSeq System, iSeq 100 System, NextSeq 550 System, NextSeq 2000 System, NextSeq 1000 System, MiniSeq System, NovaSeq 6000 System NextSeq 550 System, NextSeq 2000 System, NextSeq 1000 System, NovaSeq 6000 System
작용 기전 폴리A 포획, 라이게이션 기반 어댑터 및 인덱스 추가 Oligo-dT 비드가 폴리A 꼬리 포획 Bead-linked transposome 효소 rRNA 제거, 어댑터 및 인덱스의 라이게이션 기반 첨가
방법 mRNA sequencing mRNA sequencing mRNA sequencing, Targeted RNA sequencing, Target enrichment Whole-transcriptome sequencing, Metatranscriptome sequencing
멀티플렉싱 최대 384개의 고유한 듀얼 인덱스(UDI) 1~96 최대 384개의 고유한 듀얼 인덱스(UDI) 최대 384개의 고유한 듀얼 인덱스(UDI)
Nucleic acid type RNA RNA RNA RNA
특수 샘플의 종류 Not FFPE-compatible, Low-input samples Not FFPE-compatible Blood, Low-input samples, FFPE tissue Microbiome samples, Low-input samples, FFPE tissue
Species category Mammalian, Bovine, Mouse, Human, Rat Mammalian, Bovine, Mouse, Human, Rat Human, Virus Mouse, Human, Rat, Bacteria
종 세부 사항 폴리A 꼬리가 있는 종의 고품질 RNA로 작업 폴리A 꼬리가 있는 종의 고품질 RNA로 작업 Ribo-Zero Plus는 인간 세포질 및 미토콘드리아 rRNA, 마우스 rRNA, 랫트 rRNA, 박테리아(E. coli 및 B. 서브틸리스) rRNA, 및 인간 베타 글로빈 전사물을 포함하는 다수의 종으로부터 풍부한 전사물을 고갈시킨다.  Ribo-Zero Plus 미생물군유전체는 Ribo-Zero Plus에서 고갈된 것들과 다양한 미생물종 및 ATCC MSA-2002, MSA-2005 및 MSA-2006 을 포함한 여러 종의 풍부한 전사물을 고갈시킨다.
Strand specificity Stranded Stranded Non-stranded Stranded
시스템 호환성 세부 사항 라이브러리 준비는 모든 Illumina 시퀀싱 시스템과 호환되도록 설계되었으며 NextSeq 500/550 및 NovaSeq 6000 시스템에서 광범위한 검증 절차를 거쳤습니다.
Technology Sequencing Sequencing Sequencing Sequencing
변이 클래스 Single nucleotide polymorphisms (SNPs), Gene fusions, Novel transcripts, Transcript variants Single nucleotide polymorphisms (SNPs), Gene fusions, Novel transcripts, Transcript variants Single nucleotide polymorphisms (SNPs), Gene fusions, Novel transcripts, Transcript variants Single nucleotide polymorphisms (SNPs), Gene fusions, Novel transcripts, Transcript variants

선택 도구:

그림 자료

성과 지표 비교

(왼쪽) Illumina 가닥 mRNA 제조(오른쪽) Illumina 가닥 mRNA 제조에 대한 성능 메트릭을 TruSeq 가닥 mRNA와 비교하였다. Illumina Stranded mRNA Prep은 특히 25 ng UHR RNA의 입력으로 우수한 성능을 보였다.

낮은 입력에서 더 큰 유전자 발견

Illumina Stranded mRNA Prep은 TruSeq Stranded mRNA에 비해 낮은 RNA 입력으로 더 큰 유전자 검출을 가능하게 합니다. 검출된 유전자의 수는 30M 서브샘플링된 쌍-말단 판독 PF에서 보고된다. 1배 범위로 검출되는 유전자가 많을수록 민감도가 높다는 지표입니다.

레거시 키트와의 높은 일치도

Illumina Stranded mRNA Prep은 (A) 100 ng UHR RNA의 등가 입력 및 (B) 25 ng 대 100 ng UHR RNA의 감소된 입력에서 TruSeq Stranded mRNA와 매우 일치하는 데이터를 생성합니다.

높은 데이터 일치성

Illumina Stranded mRNA Prep은 (A) 25 ng UHR RNA의 기술적 복제물과 (B) 25 ng 및 100 ng UHR RNA의 입력량 간에 높은 데이터 일치를 달성한다. 라이브러리를 2 × 74 bp에서 시퀀싱하고, 30M 판독으로 서브샘플링하였다. BaseSpace RNA-Seq 정렬 앱을 사용하여 데이터 분석을 수행하였다.

Illumina Stranded mRNA Prep 워크플로우

Illumina Stranded mRNA Prep은 작업 시간을 단축하면서 빠른 워크플로를 제공합니다. 시간은 사용된 장비, 처리된 샘플 수, 자동화 절차 또는 사용자 경험에 따라 달라질 수 있습니다.

FAQ

중복 유전자로부터 유전자 발현을 정확하게 확인하기 위해, 기원 가닥에서 발견되는 정보를 보관하는 것이 중요하다. 가닥화된 RNA-Seq는 제1 및 제2 cDNA 가닥이 구별될 수 있게 하여, 제1 cDNA 가닥(원산지 가닥)이 추가 PCR 증폭을 거치는 동안 제2 가닥이 분해될 수 있게 한다.

라이브러리 준비에는 6.5시간이 소요되며 실제 작업 시간은 3시간 미만입니다.

올리고(dT) 자성 비드는 폴리A 꼬리를 함유하는 mRNA를 포획하고 정제한다. 정제된 mRNA를 단편화하고 역전사효소 및 무작위 프라이머를 사용하여 1가 cDNA로 복사한다. 두 번째 가닥 cDNA 합성 단계에서, dUTP는 가닥 특이성을 달성하기 위해 dTTP를 대체한다. 최종 단계는 아데닌 및 티민 염기를 단편 말단 및 결찰 어댑터에 첨가한다. 생성된 생성물을 정제하고 시퀀싱을 위해 선택적으로 증폭시킨다.
/ 결과

라이브러리 프렙 (2)

Illumina® Stranded mRNA Prep, Ligation (16 Samples)

20040532

16개의 라이브러리(16개의 1-플렉스 증균 반응)를 준비하고 증균하기 위한 시약이 포함되어 있습니다. 증균 프로브 패널, 정제 비드 및 인덱스 어댑터를 별도로 구입하십시오.

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Discounts:

Illumina® Stranded mRNA Prep, Ligation (96 Samples)

20040534

96개 라이브러리(32, 3-플렉스 농축 반응)를 준비하고 농축하기 위한 시약이 포함되어 있습니다. 증균 프로브 패널, 정제 비드 및 인덱스 어댑터를 별도로 구입하십시오.

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인덱스 어댑터 (8)

Illumina® RNA UD Indexes Set A, Ligation (96 Indexes, 96 Samples)

20091655

Illumina® RNA UD 인덱스 세트 A, 결찰(96 인덱스, 96 샘플) 96개의 샘플 및 RNA 인덱스 앵커 플레이트에 라벨을 부착하기에 충분한 96, 10 bp 인덱스를 포함합니다. Illumina Stranded Total RNA Prep 및 Illumina Stranded mRNA Prep 키트와 함께 사용됩니다. 라이브러리 준비 시약을 별도로 구입합니다.

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Illumina® RNA UD Indexes Set B, Ligation (96 Indexes, 96 Samples)

20091657

Illumina® RNA UD 인덱스 세트 B, 결찰(96 인덱스, 96 샘플) 96개의 샘플 및 RNA 인덱스 앵커 플레이트에 라벨을 부착하기에 충분한 96, 10 bp 인덱스를 포함합니다. Illumina Stranded Total RNA Prep 및 Illumina Stranded mRNA Prep 키트와 함께 사용됩니다. 라이브러리 준비 시약을 별도로 구입합니다.

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Illumina® RNA UD Indexes Set C, Ligation (96 Indexes, 96 Samples)

20091659

Illumina® RNA UD 인덱스 세트 C, 결찰(96 인덱스, 96 샘플) 96개의 샘플 및 RNA 인덱스 앵커 플레이트에 라벨을 부착하기에 충분한 96, 10 bp 인덱스를 포함합니다. Illumina Stranded Total RNA Prep 및 Illumina Stranded mRNA Prep 키트와 함께 사용됩니다. 라이브러리 준비 시약을 별도로 구입합니다.

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Illumina® RNA UD Indexes Set D, Ligation (96 Indexes, 96 Samples)

20091661

Illumina® RNA UD 인덱스 세트 D, 결찰(96 인덱스, 96 샘플) 96개의 샘플 및 RNA 인덱스 앵커 플레이트에 라벨을 부착하기에 충분한 96, 10 bp 인덱스를 포함합니다. Illumina Stranded Total RNA Prep 및 Illumina Stranded mRNA Prep 키트와 함께 사용됩니다. 라이브러리 준비 시약을 별도로 구입합니다.

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IDT® for Illumina® RNA UD Indexes Set A, Ligation (96 Indexes, 96 Samples)

20040553

96개의 검체 및 RNA 인덱스 앵커 플레이트에 라벨을 부착하기에 충분한 96, 10 bp 인덱스를 포함합니다. Illumina Stranded Total RNA Prep 및 Illumina Stranded mRNA Prep 키트와 함께 사용됩니다. 라이브러리 준비 및 프로브 패널을 별도로 구입합니다.

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IDT® for Illumina® RNA UD Indexes Set B, Ligation (96 Indexes, 96 Samples)

20040554

96개의 검체 및 RNA 인덱스 앵커 플레이트에 라벨을 부착하기에 충분한 96, 10 bp 인덱스 포함. Illumina Stranded Total RNA Prep 및 Illumina Stranded mRNA Prep 키트와 함께 사용됩니다. 라이브러리 준비 및 프로브 패널을 별도로 구입합니다.

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IDT® for Illumina® RNA UD Indexes Set C, Ligation (96 Indexes, 96 Samples)

20040555

96개의 검체 및 RNA 인덱스 앵커 플레이트에 라벨을 부착하기에 충분한 96, 10 bp 인덱스를 포함합니다. Illumina Stranded Total RNA Prep 및 Illumina Stranded mRNA Prep 키트와 함께 사용됩니다. 라이브러리 준비 및 프로브 패널을 별도로 구입합니다.

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IDT® for Illumina® RNA UD Indexes Set D, Ligation (96 Indexes, 96 Samples)

20040556

96개의 검체 및 RNA 인덱스 앵커 플레이트에 라벨을 부착하기에 충분한 96, 10 bp 인덱스 포함. Illumina Stranded Total RNA Prep 및 Illumina Stranded mRNA Prep 키트와 함께 사용됩니다. 라이브러리 준비 및 프로브 패널을 별도로 구입합니다.

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서비스 (1)

Illumina Stranded mRNA Library Prep Training

20044765

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/ 결과

NovaSeq X 시리즈 주문

발전된 화학 반응, 광학 및 인포매틱스가 결합되어 뛰어난 속도와 데이터 품질, 뛰어난 처리량과 확장성을 제공합니다.

MiSeq Reagent Kit v3

클러스터 밀도와 판독 길이를 높여 이전 버전에 비해 시퀀싱 품질 점수를 개선하는 최적화된 시약 키트입니다.

TruSight Oncology 500

FFPE 조직의 모든 주요 변이 계열과 유전자 시그니처(TMB, MSI, HRD)를 포함하는 대형 범암 패널로 CGP를 활성화합니다.

Illumina DNA Prep

광범위한 시퀀싱 애플리케이션에 사용하기 위한 매우 정확한 데이터를 생성하는 효율적이고 빠른 통합 라이브러리 프렙 워크플로우입니다.

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